วิธี ELISA

ของ การทดสอบ ELISA เป็นการตรวจทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ซึ่งส่งผลให้เกิดปฏิกิริยาที่เรียกว่าแอนติเจน - แอนติบอดี สามารถทดสอบแอนติเจนต่างๆที่มีบทบาทในการแพทย์ของมนุษย์หรือสัตวแพทย์ได้ ในประเทศเยอรมนีมีเพียงสถาบันห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองเท่านั้นที่ได้รับมอบหมายให้ทำการทดสอบ

ขั้นตอนคืออะไร?

การทดสอบ ELISA เป็นหนึ่งในวิธีการทางภูมิคุ้มกันที่เรียกว่าในการทดสอบทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ ขั้นตอนการทดสอบสามารถใช้เพื่อตรวจจับโมเลกุลของโปรตีนในของเหลวในร่างกายได้หลายชนิด

ELISA เป็นคำย่อของ เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน. ดังนั้นจึงเป็นชื่อภาษาอังกฤษ แต่ได้รับการยอมรับในการใช้ทางการแพทย์ของเยอรมัน

การทดสอบ ELISA เป็นหนึ่งในวิธีการทางภูมิคุ้มกันที่เรียกว่าในการทดสอบทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ ขั้นตอนการทดสอบสามารถใช้เพื่อตรวจจับโมเลกุลของโปรตีนในของเหลวในร่างกายได้หลายชนิด การตรวจจับโมเลกุลเหล่านี้จะช่วยให้สามารถสรุปได้เกี่ยวกับโรคบางชนิดหรือภาพทางคลินิกซึ่งเป็นสาเหตุที่แพทย์ทำการวินิจฉัยโดยขึ้นอยู่กับผลการทดสอบ ELISA ดังกล่าว ขั้นตอนการทดสอบจึงมีความสำคัญมากในการปฏิบัติทางคลินิกในชีวิตประจำวันผู้ป่วยนอกหรือผู้ป่วยใน

ของเหลวในร่างกายที่เกี่ยวข้องเช่นเลือดเต็มส่วนหรือของเหลวจากข้อต่อจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยตรงหลังจากนำออกจากผู้ป่วย โดยปกติตัวอย่างเป็นเรื่องเร่งด่วนมากเนื่องจากวัสดุพื้นเมืองถือเป็นสิ่งที่ละเอียดอ่อนและควรได้รับการตรวจสอบโดยเร็วที่สุด สิ่งที่เรียกว่าตัวอย่างที่ซ้อนทับอาจนำไปสู่ผลลัพธ์เชิงลบที่ผิดพลาดได้เนื่องจากโปรตีนทางพยาธิวิทยาที่ตรวจพบได้ลดลงหรือถูกย่อยสลายอย่างสมบูรณ์ ที่เรียกว่าการวิเคราะห์ล่วงหน้ามีบทบาทสำคัญใน ELISA ผลที่น่าสงสัยหรือเป็นลบควรทำซ้ำอีกครั้งหากมีอาการทางคลินิก

ฟังก์ชั่นผลและเป้าหมาย

หลอดทดลองและแผ่นไมโครเทอร์ที่เรียกว่าจำเป็นสำหรับการทดสอบที่ถูกต้องในห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ที่ได้รับการรับรอง แผ่นที่มีรอยเว้ากึ่งเว้าละเอียดทำจากพลาสติกชนิดพิเศษและแต่ละแผ่นเคลือบด้วยแอนติบอดีจำเพาะ

หากตรวจพบแอนติเจนที่ตรวจพบในของเหลวในร่างกายที่จะทำการตรวจปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงจะเกิดขึ้นตามสิ่งที่เรียกว่าล็อคและหลักการสำคัญ เจ้าหน้าที่ห้องปฏิบัติการสามารถป้อนวัสดุตัวอย่างลงในเพลทด้วยตนเองโดยใช้ปิเปตหรือโดยอัตโนมัติ ในสถาบันห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ที่ทันสมัยจะใช้เฉพาะระบบอัตโนมัติเต็มรูปแบบในการวินิจฉัยโรค ELISA

อย่างไรก็ตามสิ่งเหล่านี้ต้องได้รับการตรวจสอบโดยบุคลากรที่ผ่านการฝึกอบรมผู้ช่วยห้องปฏิบัติการทางการแพทย์ - เทคนิค การควบคุมคุณภาพภายในและภายนอกที่เรียกว่ายังเป็นความรับผิดชอบของเจ้าหน้าที่ห้องปฏิบัติการโดยมีอำนาจเหนือกว่าเจ้าหน้าที่ทางการแพทย์สำหรับเวชศาสตร์ในห้องปฏิบัติการระบาดวิทยาการติดเชื้อและจุลชีววิทยา หลังจากความพยายามครั้งแรกนั่นคือหลังจากที่วัสดุถูกปิเปตลงบนจานแล้วแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจงในตัวอย่างถ้ามีอยู่จะจับกับแอนติบอดีบนแผ่นพลาสติกแล้ว

ตามด้วยวงจรการล้างด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาเพื่อขจัดปัจจัยที่ก่อกวนเช่นแอนติเจนหรือโปรตีนที่ไม่ต้องการออกจากชุด ขั้นตอนนี้สำคัญมากเพื่อหลีกเลี่ยงปฏิกิริยาเชิงบวกที่ผิดพลาด ผลลัพธ์ในเชิงบวกที่คาดคะเนโดยห้องปฏิบัติการตีความผิดอาจส่งผลร้ายแรงต่อผู้ป่วยได้ในบางสถานการณ์ ในขั้นตอนที่สองของการตรวจสอบจะมีการเพิ่มแอนติบอดีต่อไปซึ่งเชื่อมโยงกับเอนไซม์ แอนติบอดีที่มีป้ายกำกับนี้ยังจับกับแอนติเจน

ในขั้นตอนที่สามและขั้นสุดท้ายจะมีการเติมสีย้อมพิเศษในปริมาณที่กำหนดซึ่งจะถูกย่อยสลายให้มากขึ้นหรือน้อยลงจากการตกค้างของเอนไซม์ที่เหลืออยู่ มีเพียงเอนไซม์เท่านั้นที่สามารถย่อยสลายได้ซึ่งไม่เคยผูกพันกับแอนติเจนร่วมกับแอนติบอดีมาก่อน เอนไซม์อิสระสามารถแยกสีย้อมที่เพิ่มเข้ามาได้ ปริมาณที่แน่นอนของสีย้อมแยกสามารถกำหนดได้ด้วยวิธีการทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์เพิ่มเติมที่เรียกว่าโฟโตเมทรี สิ่งนี้ทำให้สามารถสรุปได้อย่างแน่นอนว่ามีแอนติเจนอยู่ในวัสดุตัวอย่างหรือไม่และมีปริมาณเท่าใด

การทดสอบ ELISA ไม่เพียง แต่ใช้สำหรับการวินิจฉัยเบื้องต้นหรือเพื่อยืนยันการวินิจฉัยที่น่าสงสัยในโรคบางชนิดและรูปภาพทางคลินิกเท่านั้น แต่ยังใช้เพื่อติดตามความคืบหน้า หากความเข้มข้นของแอนติเจนในการทดสอบลดลงในระหว่างการบำบัดการบำบัดจะถือว่าประสบความสำเร็จ

คุณสามารถหายาของคุณได้ที่นี่

➔ยาเพื่อเสริมสร้างการป้องกันและระบบภูมิคุ้มกัน

ความเสี่ยงผลข้างเคียงและอันตราย

การทดสอบ ELISA เป็นข้อมูลโดยเฉพาะอย่างยิ่งผ่านการตรวจหาโครงสร้างแอนติเจนในของเหลวในร่างกาย การทดสอบช่วยให้สามารถเรียกสิ่งที่เรียกว่าเชิงคุณภาพ แต่ยังรวมถึงคำแถลงเชิงความหมายและเชิงปริมาณเกี่ยวกับการมีแอนติเจนบางชนิดในของเหลวในร่างกาย

ไม่สามารถใช้เลือดทั้งหมดในการตรวจได้เฉพาะซีรั่มในเลือดเท่านั้น ดังนั้นการทดสอบโดยตรงกับผู้ป่วยเช่นจากเลือดฝอยที่ปลายนิ้วเช่นเดียวกับการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาอื่น ๆ ซึ่งไม่สามารถทำได้ในปัจจุบัน ในการแพทย์ของมนุษย์การทดสอบ ELISA ส่วนใหญ่ใช้เพื่อตรวจหาแอนติเจนในการติดเชื้อแบคทีเรียไวรัสหรือเชื้อรา นอกจากนี้ผลบวกทั้งหมดของเซรุ่มวิทยาตับอักเสบจะถูกตรวจสอบอีกครั้งด้วยการทดสอบ ELISA ตามมาตรฐาน

ฮอร์โมนบางชนิดเช่นฮอร์โมนการตั้งครรภ์ HCG สามารถกำหนดได้ด้วยการทดสอบ ELISA หากมีภาวะแทรกซ้อนบางอย่างเกิดขึ้นระหว่างตั้งครรภ์ความรู้ที่แม่นยำเกี่ยวกับความเข้มข้นของฮอร์โมนการตั้งครรภ์ในเลือดจะเป็นประโยชน์อย่างมากในการวินิจฉัยและการรักษา ข้อบ่งชี้อีกประการหนึ่งสำหรับการทดสอบคือการตรวจหาสิ่งที่เรียกว่า paraproteins ในปัสสาวะที่เกิดขึ้นตัวอย่างเช่นในโรคเนื้องอกต่างๆเช่น multiple myeloma

การทดสอบ ELISA ยังคงดำเนินการในห้องปฏิบัติการหลายแห่งในปัจจุบัน แต่ผู้เชี่ยวชาญถือว่าล้าสมัย ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ในการทดสอบ ELISA ได้ถูกแทนที่มากขึ้นในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมาโดยแอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีซึ่งให้ผลลัพธ์เชิงปริมาณที่ดียิ่งขึ้น การทดสอบเหล่านี้เรียกอีกอย่างว่า RIA, Radio Immunoabsorbent Assay การพัฒนาเพิ่มเติมที่เฉพาะเจาะจงเพิ่มเติมของ ELISA คือวิธีการทางเคมีแสงเช่นการเรืองแสงหรือการเรืองแสง